ساخت گیرنده کایمریک لنفوسیت t دارای کمک محرک ox۴۰ علیه سلول های سرطان سینه

مقدمه و هدف: گیرنده­های کایمریک سلول­های t روش خوبی برای ایمنوتراپی سرطان فراهم کرده است. در این گیرنده بجای قطعه متغیر گیرنده سلول t از نانوبادی استفاده شده است. نانوبادی یا vhh کوچکترین قطعه آنتی بادی زنجیره سنگین شتری است که قابلیت اتصال به آنتی­ژن دارد و نیز همولوژی بسیاری با vh انسانی داشته، از قدرت ایمنی زایی اندکی بهره مند است. سازه رسپتور کایمریکی که در آزمایشگاه ما ساخته شده دارای vhh-hing-cd28-cd3ζ است. اگرچه گیرنده­های کایمریکی که از طریق cd3ζ فعال می­شوند اینترفرون گاما آزاد می­کنند، اما به علت نبود سیگنال­های کمک تحریکی  نمی­توانند به طور کامل فعال شوند. لذا وجود cd28 باعث رهاسازی اینترلوکین 2 شده و تکثیر تومور را محدود می­کند؛ اما باعث فعال شدن کامل t سل نمی­شود. به منظور بهبود عملکرد گیرنده­های کایمریک، اندودامین­های سه بخشی ساخته شده است که شامل cd28-ox40-cd3ζ است. به دنبال تحریک سلول­های t کمک محرک ox40 سیگنال­های قوی فعا ل سازی و طولانی مدت برای این سلول­ها ایجادمی­کند که برای حفظ پاسخ ایمنی بسیار مهم است.مواد و روش­ها: در این تحقیق پرایمرهای هم­پوشان که 60% از توالی ox40 را در برداشت سنتز و قطعه cd28-ox40-cd3ζ با روش soe pcr ایجاد شد و سپس این توالی با قطعه  cd28-cd3ζ در سازه  vhh-hing-cd28-cd3ζ جایگزین شد. بعد از انتقال این سازه به درون سلول­های jurkat) t) بیان گیرنده در سطح mrna و عملکرد آن با روش­های semi-quantitative rt pcr و کیت الایزا سنجش il-2 ارزیابی شد.نتایج و نتیجه­گیری:  نتایج حاکی از آن است که عملکرد و بیان سازه دارای ox40 بیشترشده است. با توجه به نتایج ارزیابی il-2 و semi-quantitative rt pcr می­توان چنین نتیجه گیری کرد که میزان بیان سازه های pcdna-1 hinge car-ox40 و pcdna-2 hinge car-ox40 برابرند اما عملکرد سازه pcdna-2 hinge car-ox40 بیشتر است.